产品货号:
BTN80401
中文名称:
Oligo回收试剂盒
英文名称:
Oligo and Primer Recovery Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离Oligo和引物最主要的方法,但是市场上很少有专门的产品用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收Oligo片段,为此本公司开发的本制品。
产品特点
- 可以回收15~50nt范围内的各种长度的单链或双链DNA,长于50nt的DNA可以使用性价比更高的DNA片段回收试剂盒回收。
- 回收率高达80%以上。
- 一站式,即开即用,操作简单,用户不需要自备任何试剂。
- 扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
- 也可以用于Oligo酶反应(如磷酸化和去磷酸化反应)后的去盐、脱盐和纯化。
组分 | 规格 |
Oligo和引物回收溶液A | 15mL |
Oligo和引物回收溶液B | 15mL |
Oligo和引物回收溶液C | 15mL |
Oligo和引物回收溶液D | 50mL |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脱液 | 10mL |
保存:室温,有效期1年。
- 回收PAGE胶中的Oligo
- 切取含OLIGO片段的PAGE凝胶(100mg左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入1.5mL离心管中,用移液枪头尽可能捣碎(最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。
- 按重量比为1∶2的比例加入Oligo和引物回收溶液A(100mg PAGE凝胶需要加入200μL Oligo和引物回收溶液A)。bi
- 将离心管水平放置并室温摇晃1~3个小时以让Oligo从PAGE凝胶中扩散出来。
- 12000~15000g室温离心2分钟,将含Oligo的上清液转移到新的离心管中。
- 再用100μL的Oligo和引物回收溶液A洗涤凝胶一次并与上步得到的上清合并。
- 在上步得到的溶液中加入300μL Oligo和引物回收溶液B、300μL Oligo和引物回收溶液C和750μL Oligo和引物回收溶液D,充分混合均匀后分两次将混合液转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置3分钟,然后再12000~15000g离心1分钟,倒掉收集管中的穿透液。
- 加入600~800μL通用洗柱液于离心吸附柱中。
- 12000~15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。
- 12000~15000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
- 将离心吸附柱置于一自备的1.5mL塑料离心管中,加入25~50μL通用洗脱液,静置3分钟。
- 12000~15000g离心1分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的Oligo溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
- 可以PAGE电泳检查回收效率,最好使用超高灵敏的超快核酸银染试剂染色以节约OLIGO样品的用量。
- 切取含OLIGO片段的PAGE凝胶(100mg左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入1.5mL离心管中,用移液枪头尽可能捣碎(最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。
- 回收溶液中的Oligo和引物
- 在含OLIGO的、体积不超过100μL的反应液中,加入300μL Oligo和引物回收溶液A,混合均匀。
- 再加入300μL Oligo和引物回收溶液B、300μL Oligo和引物回收溶液C和750μL Oligo和引物回收溶液D,充分混合均匀后分两次将混合液转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置3分钟,然后再12000~15000g离心1分钟,倒掉收集管中的穿透液。
- 加入500μL通用洗柱液于离心吸附柱中,12000~15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。如果有必要,可以重复洗涤步骤一次。
- 12000~15000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
- 将离心吸附柱置于一自备的1.5mL塑料离心管中,加入25~50μL通用洗脱液,静置3分钟。
- 12000~15000g离心1分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的Oligo和引物溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
- 可以PAGE电泳检查回收效率,最好使用超高灵敏的超快核酸银染试剂染色以节约OLIGO样品的用量。
- 在含OLIGO的、体积不超过100μL的反应液中,加入300μL Oligo和引物回收溶液A,混合均匀。
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